分離純化的基本步驟
更新時間:2021-12-31 點擊次數(shù):6620
每一種生物物質在結構、理化性質、生物學性質上千差萬別,加之原材料的來源、最終產(chǎn)品的用途等也有所不同。因此,不同的生物物質有多種不同的分離純化手段,即便是同一種物質,不同技術路線或生產(chǎn)線也可采取不同的分離純化工藝。但大多數(shù)生物物質的分離純化有一個基本框架,即常常按生產(chǎn)過程的順序分為以下幾個步驟。
該步驟的目的是將目標產(chǎn)物從起始原材料(如器官、組織或細胞)中釋放出來,同時保護目標產(chǎn)物的生物活性。
由于技術和經(jīng)濟原因,在這一步驟中能選用的單元操作相當有限,過濾和離心是基本的單元操作。為了加速固-液兩相的分離,可同時采用凝聚和絮凝技術;為了減少過濾介質的阻力,可采用錯流膜過濾技術,但這一步對產(chǎn)物濃縮和產(chǎn)物質量的改善作用不大。
如果產(chǎn)物在濾液中,若要求通過這一步驟能去除與目標產(chǎn)物性質有很大差異的可溶性雜質,使產(chǎn)物濃度和質量都有顯著提高,常需經(jīng)過一個復雜的多級加工程序,單靠一個單元操作是不可能完成的。這步可選的單元操作范圍較廣,如吸附、萃取和沉淀。
該步驟僅有有限的幾類單元操作可選用,但這些技術對產(chǎn)物有高度的選擇性,用于除去有類似化學功能和物理性質的可溶性雜質,典型的單元操作有色譜分析、電泳和沉淀等。
產(chǎn)物的最終用途和要求決定了最終的加工方法,濃縮和結晶常常是操作的關鍵,大多數(shù)產(chǎn)品必須經(jīng)過干燥處理,有些還需進行必要的后加工處理(如修飾、加入穩(wěn)定劑)以保護目標產(chǎn)物的生物活性。